显色以下各步均在室温下进行。
（1）缓冲液I洗1min。
（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的缓冲液I孵育切片30min。
（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的缓冲液I稀释羊抗Dig。
（4）将稀释液滴加在切片上，封口膜覆盖，湿盒内4℃孵育过夜。
（5）缓冲液I洗10min。
（6）缓冲液Ⅱ洗10min。
（7）加显色液，封口膜覆盖，避光室温孵育2～20h，随时镜检，当显色满意时入缓冲液Ⅲ终止显色。
显色液临用前配，其配方为：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑 2.4mg；④缓冲液Ⅱ 加至10ml。
（8）常规脱水、透明、封固。
结果：杂交阳性信号为紫蓝色颗粒。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
阴性对照用已知不存在相应靶序列的***标本杂交，结果应为阴性。阴性对照可排除在杂交过程中由于非特异性杂交反应等因素造成的假阳性结果。
阳性对照用已知含靶序列的***切片与待检标本同样处理，结果应为阳性，原位杂交，称阳性对照。通过阳性对照可证明杂交过程中各个步骤以及所使用的***都合乎标准，实验方法可靠。尤其当待检标本为阴性时，阳性对照片呈阳性反应可排除待检标本假阴性的可能。故若预期杂交结果为阴性时，就必须设阳性对照，当阳性对照亦不显色，就证明杂交过程的某一步骤或所用***问题。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
预杂交1）每个管中置换成大约300ulHYB－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。2）用等体积的HYB+取代HYB－。3）60℃水浴，预杂交4小时以上。
原位杂交-思特进(推荐商家)由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司为客户提供“动植物，***，细胞生物实验”等业务，公司拥有“思特进”等品牌，专注于办公、文教项目合作等行业。，在湖北省武汉市江夏区高新四路40号葛洲坝的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：夏经理。
