冻存袋技术
是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的作用。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，200-074-401冻存袋代理，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。
冻存袋实验前的准备
生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降温机
冷冻方法理论准备:
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-8O℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量消失，亦可跳过此步骤直接放入-8O℃冰箱中。
(2）程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至（-8o℃以下) -120℃，再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
细胞冻存步骤
1.用移液器吸走原培养基，加入适量PBS洗1-2遍;
2.加入适量胰酶，CS50冻存袋代理，置于培养箱中消化;
3.待消化到位后加入适量血浆或完全培养基终止消化，800-1000rpm离心3-5min;
4.配制冻存液，CS250冻存袋代理，待细胞离心后去上清，加入冻存液重悬，调整细胞浓度为3×106~1×107 cells/mL，冻存袋代理，转移到冻存管中;
5.将冻存管放入程序降温盒中，-80度过夜，然后转移到液氮中保存。
6.冻存细胞后应取出一管复苏，检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存，
为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养，观察细胞生长情况，再继续冻存
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