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冻存袋使用注意事项

1.  取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致。

2.  冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二亚砜（DMSO）对细胞不是完全，在常温下，200-074-400冻存袋多少钱，二亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二亚砜（DMSO）选择进口产品。

3.  离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。

冻存袋细胞复苏操作步骤

1.操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。

3.将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。

4.取出冷冻管，立即放入3℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。

5.取出解冻之细胞悬浮液，冻存袋代理，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15)，混合均匀，CS250冻存袋批发，放入培养箱培养。取0.1m1解冻细胞悬浮液作存活测试。

6.解冻后是否立即去除冷冻保护剂，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10m1培养基之离心管内，离心 1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入培养箱培养。

冻存袋的背景知识

采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min，冻存袋，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。