细胞冻存离心问题
目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，200-074-400冻存袋供应商，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了会受压过大， 。此外在操作过程中容易污染，200-074-400冻存袋代理，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒***，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。
冻存袋注意事项
可用于细胞在-196℃液氮中的存储和转运。所有冻存袋都是无菌即用型包装。冻存袋对于大量细胞的冻存非常方便，但使用过程中还有些小地方需要注意。较大冻存体积的推荐是参照冻存袋平放，液体厚度8mm时液体的体积。增加冻存液体的量，冻存袋到是能装下，但细胞复苏的时候就麻烦了，液体厚度太大，融化所需时间太长，细胞活率要受很大的影响啊！
细胞冻存的操作步骤
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，200-074-400冻存袋多少钱，去除旧培养液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，200-074-400冻存袋，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
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