内切酶-友名生物公司(图)

限制酶作为酶类，诀定其催化作用具有高1效性、专一性和作用条件温和等特点。其中专一性的具体表现为:某种限制酶只能催化DNA上特定序列特***点的磷酸二脂键水解，结果是使DNA分子被分割成不同的DNA部分片段。限制酶所识别的双链DNA上的序列具有“回文对称”性质，即无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，即错位平切，产生的是黏性末端;当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，即平切，产生平末端。错位切的限制酶在***工程中比较会常使用到，因为与平末端相比较，黏性末端更有利于DNA部分片段的连接。

限制酶有什么作用？

在DNA重组技术中，限制酶主要用于：

1.在特异位点上切割DNA，产生特异的限制酶片段；

2.建立DNA分子的限制酶图谱；

3.构建***文库；

4.用限制酶切出的相同的粘性末端，以便重组。

5.许多***用切割外来DNA的方法进行自我保护，如切割感1染性噬菌体的DNA.这些***产生一种能切割DNA的核酸内切酶，一旦发现外来DNA便将其切割，内切酶，因此它们有效地限制了噬菌体对***的感1染，故这种核酸内切酶被称为限制酶.

6.每种限制酶特异识别专一DNA序列，并在切割位点将其准确切割.

限制性内切酶的质量控制鉴定

限制性内切酶的一个活性单位是指，在50μl 的反应体系里，采用随酶提供的 NEBuffer，用1个小时的时间，消化1μg底物DNA所需要的酶量。酶切反应应在带盖的eppendorf 管中进行，选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前，浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1，000 单位/ml。

质量控制

所有质量控制鉴定结果都公布在随酶提供的技术数据卡上。

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