逆转录病毒滴度测定-武汉友名生物

PCR核酸检测实验室布局建设

核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）

1、穿戴流程：在***扩增实验室的清洁区（更衣区）或者普通实验室的洁净区，工作人员按顺序依次穿戴好一次性帽子、医1用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、防护目镜和双层乳胶手套，进入样本处理工作区域或实验室。

2、要点提示：

2.1、具备标准***扩增布局条件的实验室，应在清洁更衣区做好个人三级防护，条件有限的实验室亦可选择在一洁净的实验室中按流程穿戴好个人三级防护。

2.2、需佩戴医1用N95口罩，若无医1用N95口罩，可以考虑用普通N95/KN95口罩外加一次性外1科口罩的组合方式，但不要佩戴有呼吸阀的N95口罩。

2.3、佩戴N95口罩时需检查密闭性，通过双手按压、深呼吸、左右转头等动作严格检查口罩是否佩戴正确。

2.4、一次性防护服已具备新型冠状病毒核酸检测的防护需求，有条件时可以考虑加穿一次性反穿隔离衣，穿衣时需由他人协助。

2.5、穿戴整齐的工作人员，应按要求尽快进入样本处理的实验区域开展工作，严禁穿戴三级防护后再进入普通实验区域或办公区域。

　　农杆1菌转化法在植物遗传转化中的应用：过去认为受农bacillus宿主范围限制，农bacillus介导的遗传转化只限于双子叶植物。1987年Grimsly首先将玉米条斑病毒的cDNA克1隆至质粒上，用农bacillus侵染的方法将玉米条斑病毒的cDNA导入玉米，使植株表现了系统感1染症状。这个报道有力地证明了农bacillus能够侵染玉米这种单子叶植物。随着载体系统和转化方法的改进，农bacillus介导的遗传转化不再局限于双子叶植物，逆转录病毒滴度测定，在一些单子叶植物如水稻、玉米和小麦等重要的农作物上也相继获得成功。

　　进入20世纪90年代后，农杆1菌转化法在水稻、玉米等重要的农作物上取得突破性进展。首先是1991年Gould和Shen等利用农bacillus转化玉米茎尖分生***获得转0***植株。1998年Lupotto也实现了农bacillus转化玉米的成功，Southern杂交结果显示外源***能够稳定遗传到下一代。

腺病毒的***组

腺病毒的***组以线性的双链DNA形式存在，由蛋白VII和一种称为mu的小蛋白紧密地环绕在其周围，起到类组蛋白样的作用。另一种蛋白V将这种DNA-蛋白复合物连接起来，并通过蛋白VI与病毒衣壳连接在一起。在两条链的5′端各以共价键结合着一个被称为DNA末端蛋白（pTP）复合物（DNA-TPC）的特化的结构，与腺病毒copy密切相关。腺病毒***组的两端各有一段100bp的反向末端重复序列（ITR），是copy的起始位点。在左端ITR的3′侧有一段长约300bp的包装信号（ψ）介导腺病毒***组包装入病毒衣壳。对腺病毒而言，只有包括两端的ITR和包装信号（ψ）的约0.5kb的序列是顺式作用元件，也就是说必须由腺病毒载体自身携带，而其他的30余种蛋白都可以通过辅助病毒（或细胞）反式补足。