ELISA定量测定
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多,植物RNA提取,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线***高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,***较呈直线的部分是相对理想的检测区域。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因***盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
多酚氧化酶(PPO)活性检测***盒(比色法),#KTB1140:多酚氧化酶(PPO)能够催化Catechol产生醌,后者在525 nm有特征光吸收,测定525 nm光吸收增加的速率进而计算多酚氧化酶(PPO)活性。该***盒适用的样本范围广泛包括serum、血浆、***、细胞、***;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
血钾(K?)检测***盒(比色法),#KTB2100:serum中钾离子(K+)与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比;通过测定其浊度来测定serum钾含量。该***盒提供了一种简单的检测方法检测serum样本中钾离子(K+)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
RNA***盒注意事项
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专1用提取***盒, 如果不是专1用***盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性,会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克1隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是RNA提取***盒,但其售价较高,单次实验费用花费太大,对精度要求不高的实验没有必要购买,当然还有其它的进口***盒,但是均存在价格高、订货周期长的问题(如果碰上国内无货的时候,要从国外发货,会等很长一段时间)。普通的提取实验用国产的***盒就足以,价格不高,基本上各地均有现货,如天根(国内生产的***盒中销售面比较广的一种)等,其价格比进口***盒要便宜许多,且效果还不错,还可以
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