cGMP ELISAkit-武汉纽斯特(推荐商家)

***盒储存要求

本***盒所有组分在有效期限内，于4℃稳定保存。为了长效的实验，1000×储液请保存于-80℃。本***盒未提供的必需***

1. 去离子水或蒸馏水。

2. 浓盐酸。

3. 量程在5μL至1000μL之间的精密移液管。

4. 量程为50μL和200μL的中继移液器。

5. 用于稀释储液的一次性烧杯。

6. 刻度量筒。

7. 微孔板振荡器。

8. 吸水纸。

9. 酶标l仪，可读波长450nm，在570nm至590nm之间应有修正。

其他ELISA***盒的多克l隆抗cAMP抗l体与乙酰化cAMP的亲和力明显高于非乙酰化cAMP，本***盒的单克l隆cAMP抗l体与乙酰化或非乙酰化cAMP具有同样的亲和力 。因此，纽斯特生物cAMP ELISA***盒中的样品和标准品不需要乙酰化处理，cGMP ELISAkit，从而明显缩短了分析时间，有效避免了乙酰化过程中的有机***的使用，为大家提供了一个更安全、更健康的工作环境。

实验步骤

使用前将各种***取出放置30分钟，平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。

快速加入***至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔(0 pmol/mL cAMP标准品)。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔。7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。

8. 移取50μL 抗l体工作液至各孔中，除了TA(全活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非特异结合)孔。

9. 将酶标孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合，并避光放置。）

14. 每孔加入50μL终止液。终止后立即读数。

15. 清除酶标l仪Blank(空白)孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank(空白)孔光密度值。