冻存细胞复苏步骤
1. 从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,将其中的混合液移至离心管中,1000rmp,5分钟离心收集冻存细胞沉淀,移去上清液(操作时 小心,切勿将细胞沉淀移去)。
3. 加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
4. 镜检细胞后,细胞冻存液,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。
无血0清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(肿0瘤细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80℃长期保存(>5年)。CELLS***ING配方成分明确,不含动物来源性蛋白,不含血0清,可减少各类***、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适合于无血0清培养细胞和蛋白表达细胞。
细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
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