DOI:搭建信息资源的桥梁
数字对象唯0一标识(digital object identifier,DOI)被形象地称为“英特网上的条形码”,如同贴了标签的商品,数字对象一旦被分配一个DOI号,无论它处于英特网上的任何位置,通过DOI都能够找到它,因此解决了传统网络标识系统的不稳定性,实现了更有效的网络链接。DOI技术即将成为国际上数字出版界构建数字信息交换平台的首要选择。
腹0水的纯化
采集复水后,12 000 r/min 离心 15 min,去掉 沉淀等杂质。往离心后的腹0水中加入等体积的 PBS,并添加***铵固体至 50% 饱和,静置 2 h,12 000 r/min离心15 min,弃 上 清,转染***盒,用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀,然 后 再次加入***铵固体至 45% 饱和,静置两个小时左右,12 000 r/min 离心 15 min 弃去上清,用少量 PBS 溶解沉淀,即得到较纯的抗0体,对 PBS 透析除去***铵,透析时间为24 h,透析过程中更换透析液两至三次。
1. 9 腹0水效价的测定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL,包被Elisa 酶标板过夜,以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照,用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价,用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳,用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗,设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。
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