动物有上百万种不同的B淋巴细胞系,具有不同***的B淋巴细胞合成不同的***。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别各个具有不同***的B细胞。被的B细胞分裂增殖形成效应B细胞和记忆B细胞,大量的浆细胞合成和分泌大量的***分子分布到血液、体液中。
如果能选出一个制造一种专一***的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,PIK3CA(E542Q)***,即单。单细胞将合成针对一种抗原决定簇的***,称为单***。
突变的流程
1. 在dam+ 阳性的宿主菌E. coli.增殖获得化的模板DNA
2. 设计2条互补匹配的、突变位点居***的突变引物
3. 加入反应组分如buffer、 temte、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme
4. 运行反应
5. Dpn I 消化化的模板
6. 转化感受态细胞、铺板筛选
7. 提取 DNA、测序鉴定
体外突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是实验室中改造/优化***常用的手段。蛋白质的结构决定其功能,二者之间的关系是蛋白质组研究的***之一。对某个已知***的特定碱基进行改变、缺失或者插入,可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构,对突变***的表达产物进行研究有助于人类了解蛋白质结构和功能的关系,探讨蛋白质的结构/结构域。
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