动物免0疫
使用 quickantibody 作为免0疫佐剂,对小鼠腿部肌肉***免0疫,MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL) 与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只,弗氏不完全佐剂的成分,每只*** 100 μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫,第 35 天尾静脉取少量血做效价检测,间接 ELISA 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫,冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次,每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。
作用机制:
佐剂增强免0疫应答的机制可能有:①改变抗原物理性状,延长抗原在机体内的存在时间和保持对免0疫系统的持续激0活作用,佐剂中的矿物油成分主要起缓释作用,有利于抗原在体内缓慢释放,延缓抗原在体内降解,从而更有效地刺激免0疫系统。②使抗原易被巨噬细胞吞噬,刺激单核巨噬细胞系统,增强其对抗原的处理和呈递抗原的能力。③促进淋巴细胞的增殖、分化,从而扩大和增强机体的免0疫应答的效应。
QuickAntibody抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高。以标准免0疫程序为例,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得ELISA滴
度(Cutoff值为0.1000)高达1:10000-1:10000000的高亲合力抗0体水平。
QuickAntibody不***抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。
QuickAntibody是水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可免0疫动物。
QuickAntibody使用肌肉免0疫途径,与常规小鼠单克0隆抗0体制备过程中使用足垫或脾内免0疫相比,极大方便了使用。
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