慢病毒-苏州博特龙公司(在线咨询)

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

抗0体亚型鉴定原理：

抗0体亚型鉴定的原理是利用双抗0体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克0隆抗0体或特异亲和纯化的单克0隆抗0体的类和亚类（可区分出 IgG1﹨IgG2a﹨IgG2b﹨IgG3﹨IgM﹨IgA）。采用小鼠抗0体共有位点的二抗包被微孔板，与加入的培养上清中的小鼠抗0体结合，再加入HRP 标记的抗小鼠各类、亚类的抗0体来分别反应，***后用 TMB 底物系统显色并用稀***终止，再通过酶0标仪检测吸光度来判断被测单克0隆抗0体的类或亚类。

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取血：

免0疫一周后，可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低，头两次取血，够检测用即可。在三次免0疫后，可以获得较高0效价的抗0体，每次取血量可以在40ml，不要取太多，否则会造成兔子贫0血。

前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血，室温过夜析出血0清。

***后一次取血可以采用颈动脉放血，具体操作如下：

1、家兔仰卧于兔架上固定头部，用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。

2、沿颈部中线用***刀切开皮肤约10cm，分离皮下结缔***，直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作，如碰到小血管出血，慢病毒，可用止血钳止血)。

3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松***，暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离，剥离***和结缔***。

4、于动脉下套入两根黑丝线，分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。

5、用小拇指垫在血管下，用尖头眼0科***剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断)，插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上，以防放血管滑脱。

6、松开止血钳，使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。

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什么是单克0隆抗0体？

单克0隆抗0体(MAb)，是针专一的抗原决定簇产生的抗0体，单克0隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年，由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗0体的B细胞与肿0瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗0体。

单克0隆抗0体制备的原理是什么？

要制备单克0隆抗0体需先获得能合成专一性抗0体的单克0隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨0髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨0髓瘤细胞与免0疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂0种的骨0髓瘤细胞。这种杂0种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗0体的特性，也有骨0髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克0隆抗0体。