QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子,不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委
托专门单位制备。使用QuickAntibody免0疫佐剂,任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆抗0体,标准免0疫程序只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。(强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克0隆抗0体,1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体足以满足绝大多数用户的实验需求,快速佐剂,包括用于酶联免0疫、免0疫印迹、流式细胞、免0疫组化和免0疫沉淀等)。
QuickAntibody建议常温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期18个月。
细胞融合
取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液,计数。收集选择生长状态良好的 SP2 /0 骨0髓瘤细胞,制成细胞悬液,计数。将 SP2 /0 骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以 1∶ 10 在 50% 的 PEG1500 作用下融合[8]。加 HAT 选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的 3 块 96 孔细胞培养板。放入37 ℃ ,含 5% 的 CO2 培养箱中培养。
抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的制备和鉴定
摘要: 制备抗 果 蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体可用于研究果蝇 mrj 的 生 物 学 功 能,使 用 IPTG 诱 导 重 组 质 粒pET28a-mrj 在大肠杆0菌 Rosetta 中表达,重组蛋白经过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化后免0疫 BALB/c 小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0脏细胞与小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 融合,经克0隆和筛选获得了能分泌抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的杂交瘤细胞株。腹0水制备后获得单克0隆抗0体,通过 ELISA 和 Western Blot 对所获得的抗0体进行鉴定,结果表明所制备单克0隆抗0体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的 MRJ 蛋白,可用于研究 mrj ***的生物学功能。
关键词: mrj; 细胞融合; 单克0隆抗0体
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