ELISA***盒的操作方法——双夹心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，卡那***ELISA***盒供应商，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3. 加酶标：于各反应孔中，四环素ELISA***盒报价，加入新鲜稀释的酶标（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M***0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，北京ELISA***盒，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
ELISA***盒的应用领域
ELISA法是诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的病种等方面的诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本，因此，也适合于流行病学调查。本法不仅可以用来测定，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物***各领域的应用范围日益扩大，可概括四个方面：
1、酶染色各种细胞内成份的***。
2、研究抗酶的合成。
3、显现微量的沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或成份。
Elisa***盒——Elisa实验常见问题及解决方案
重复性不佳，庆大***ELISA***盒报价，高CV值
1 样品不均一 加样前充分混匀样品，取样确保移液位置一致；
2 包被板表面遭到*** 洗板加样时尽量小心，避免***板的包被表面
3 孔与孔之间的交叉污染 孵育后取下盖子小心操作，避免孔与孔的污染；封板膜不能重复使用
4 加样量不一致 样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
5 边缘效应（外周孔显色较中心孔深） 孵育时尽量100 rpm旋转混匀
6 微量加样不准确 保证微量加样的准确性和均一性
7 不正确的洗涤 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，确定每一步的洗涤
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