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柱层析技术上样用少量的溶剂溶解样品加样 ，树脂柱，加完后将底端的活塞打开 ，待溶剂层下降至石英砂面时 ，树脂柱厂家，再加少量的低极性溶剂 ，然后再打开活塞 ，如此两三次 ，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂 ，一开始不要加压 ，等溶解样品的溶剂和样品层有一段距离 (2～4 cm) ，再加压 ，这样避免了溶剂 (如等 )夹带样品快速下行。很多样品在上柱前粘性较大 ，上样后在柱上又会析出 ，这一般都是比较大量的样品才会出现 ，是因为填料对样品的吸附饱和所致。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱 ，这样就必须用干法上柱了。

装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，树脂柱价格，加入约1/3体积（），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用（）将其冲入柱中。

压实。沉降完成后，加入更多的，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，树脂柱供应，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

检测。要更多地使用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。

事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧常用吸附剂的种类：氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙（镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。几种常见吸附剂的特性（1)氧化铝：市售层析用氧化铝有碱性、酸性2类，粒度规格大多为100-150目。碱性氧化铝（pH9—10)：适用于碱性物质（如胺、)和对酸敏感的样品（如缩醛、糖苷等)，也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、***A和K等的***等不良副反应。所以，这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。酸性氧化铝（pH3.5—4.5)：适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等以及色素和醛类化合物的分离。中性氧化铝（pH7—7.5)：适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离，也可以用来分离弱的有机酸和碱等。