原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精1确定量***的过程。原位杂交可以在细胞标本或***标本上进行。
原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上DNA原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知核酸探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异DNA或RNA顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的******。
分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿l瘤易感***的检测,对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测GSTπ***以判定个体暴露于致***物是的致******性。2、肿l瘤相关病毒的检测,植物原位杂交检测服务,如采用原位杂交方法检测标本中HPV、EBER等病毒。3、疑难肿l瘤的诊断和分类,尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性***与淋巴细胞性肿l瘤上有着强大的特异性和可靠性。4、肿l瘤的个体化治l疗,能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点,对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断,如采用荧光原位杂交技术(FISH)检测HER-2***在乳l腺l***病例中的表达情况,配合术后治l疗,指导临床用药选择。
20世纪80年代的DNA原位杂交开启了分子病理检测的大门,随后相继出现了在***切片上的原位杂交,目的是检测肝1炎和肝1******中的乙1肝1病毒。之后,越来越多的肿1瘤相关***被发现,一批用于检测靶向治1疗药1物靶点的分子病理技术迅速问世,如FISH检测乳1腺***HER2***扩增、ARMS法检测肺1***1***突变等。
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