荧光原位杂交技（fish）原理：是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的***。
荧光原位杂交技（fish）实验步骤：
1、***固定：***取出洗净后立即放入固定液（DEPC水配制）中固定2-12h。
2、脱水：***固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡，包埋。
3、切片：石蜡经切片机切片，摊片机捞片，62°烤箱烤片2h。
4、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲1苯Ⅰ 15min-二甲1苯Ⅱ 15min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min，风干，DEPC水浸泡。
5、消化：根据***固定时间长短，切片于修复液中煮沸10分钟，自然冷却。后***笔画圈，根据不同***不同指标特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化20min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。
原位杂交是在分子生物学领域应用极为广泛的实验技术之一，是在研究生物体发育过程中的一种极为重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization，水稻RNA原位杂交检测技术服务，其中in situ为拉丁文，字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的核酸探针与***切片或细胞中的待测核酸中的互补序列杂交， 从而对***细胞中的核酸进行定性、***和相对定量分析。是一种直接、简便的研究******和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理
分子病理学在蛋白质和核酸等生物大分子水平上，应用分子生物学理论、技术及方法研究***发生L发展的过程，从而为传统的病理学注入了生机。在如今的临床病理诊断过程中，运用核酸原位杂交、PCR技术、免1疫荧光、免1疫***化学染色等技术，能够更加深化对***的本质认识，对于肿1瘤的诊断和治1疗也有着临床的指导意义。分子病理学诊断主要应用于以下几个方面：1、对于肿1瘤易感***的检测，对于肿1瘤高危人群的筛检具有实用价值，如检测GSTπ***以判定个体暴露于致***物是的致******性。2、肿1瘤相关病毒的检测，如采用原位杂交方法检测标本中HPV、EBER等病毒。
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