脓毒症模型
脓毒症模型方法及原理
一般构建脓毒症模型有多种方式,例如***攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等,针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺(CLP)。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种,主要是通过***方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染,从而模拟脓毒症的发生和发展。
实验方法
Step1:常规方法ma醉小鼠,剔除腹部毛发,酒精消毒
Step2:腹部正中开口,逐层打开皮肤和腹膜,暴露盲肠
Step3:使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置,挤出内容物
Step4:放置引流物,时盲肠内容物可持续流出
Step5:逐层缝合皮肤,***实验外包,碘伏消毒,将小鼠放回笼内饲养
实验动物的采集方法
1. 大鼠、小鼠的采集:用***脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的Hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查,可将胸骨或股骨剪断,将其断面的挤在有稀释液的玻片上,混匀后涂片凉干即可染色检查。
2. 大动物的采集:狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到的距离,把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。
狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点。胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生。
实验动物的选择在此,***实验外包费用,提几点原则和方法。
第①,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此***的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,***实验外包哪家好,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用***,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(STZ)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照《药理实验方法学》,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做***造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除APoE***的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,陕西***实验,你非得要用SPF实验室,这也是不太实际的,也是没必要的。
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