武汉科锐诺(多图)-植物染色体原位杂交测试服务

既要充分保留被测核酸，（特别是RNA）不被降解，又要尽可能维持原有***或细胞的形态结构。

步骤：基本与免1疫***化学技术相似，即***要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.0-7.6），含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些***对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经RNA酶***处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳，40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃超低温冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存数月之久。

原位杂交

实验原理

原位杂交技术（in situhybridization）是以标记的核酸分子为探针，在***细胞原位检测特异核酸分子的技术。

使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针，植物染色体原位杂交测试服务，在适宜条件下与***细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交，再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。

1、***取材：***取材应尽可能新鲜。由于***RNA降解较快，所以新鲜***和培养细胞在30 min 内固定。

       2、细胞***固定目的与注意事项：

       （1）保持细胞结构；

       （2）大限度地保持细胞内DNA或RNA的水平；

       （3）使探针易于进入细胞或***。

        常用的固定剂是多聚甲醛，与其它醛类固定剂不同，多聚甲醛不会与蛋白质产生广泛的交叉连接，因而不会影响探针穿透入细胞或***。