1、***取材:***取材应尽可能新鲜。由于***RNA降解较快,所以新鲜***和培养细胞在30 min 内固定。
2、细胞***固定目的与注意事项:
(1)保持细胞结构;
(2)大限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;
(3)使探针易于进入细胞或***。
常用的固定剂是多聚甲醛,与其它醛类固定剂不同,多聚甲醛不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或***。
首先,分子病理诊断为的诊断及鉴别诊断提供了依据,当遇到少见疑难或罕见病例时,尤其是通过形态学和免yi组化染色仍不能确定的类型,这时候就需要借助分子病理技术,从***水平来判断***的异常情况,协助病理医生作出相对准确的诊断并判断该***的预后及转归。应用领域广泛的要数软***和骨、淋巴造血系统,因为这些系统的相似而不同,单靠镜下表现和已知的已无法满足诊断需求。另外,分子病理检测也常常运用在分子分型中,比如大家熟知的分子分型,水稻RNA原位杂交技术服务,通过***表达谱研究,可将分为管腔A型、B型,HER-2阳性型,基底样型。
原位杂交是在分子生物学领域应用极为广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种极为重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insitu hybridization,其中in situ为拉丁文,字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的核酸探针与***切片或细胞中的待测核酸中的互补序列杂交, 从而对***细胞中的核酸进行定性、***和相对定量分析。是一种直接、简便的研究******和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理
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