实验动物的选择在此,***实验外包公司,提几点原则和方法。
第①,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此***的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用***,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(STZ)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照《药理实验方法学》,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做***造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除APoE***的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,你非得要用SPF实验室,这也是不太实际的,也是没必要的。
阑尾炎动物模型
方法 成年大鼠,后固定,无菌条件下开腹,将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜,把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内,距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层),后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1~2针,***实验外包,将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔,两层缝合关腹,无菌纱布包扎伤口,送回笼中饲养观察。或成年家兔,后固定于***台架上,备皮消毒铺巾后,无菌条件下腹正中切口开腹6cm,寻及盲肠提出阑尾,于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾,随后将阑尾纳回腹腔,逐层关腹。术后,在规定的时间点测定动物体温,行坏死阑尾炎腔内容物***培养,包囊或坏死阑尾大小的检测,以及肉眼病理观察和***形态学改变的镜检。
特点 大鼠术后15d,阑尾呈脓性坏死,外裹一层纤维性包囊,囊内含有大量的***,模型成功率高。兔术后6~12h,阑尾充血、增粗、水肿;12~24h时,阑尾肿胀、增粗更为明显,***实验,外被脓苔与周围肠管粘连,部分阑尾壁可见斑点状出血灶,腹腔内有脓性渗液出现。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血,***实验外包哪家好,甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液***培养有大肠生长。术后24h,兔体温可升至40℃左右。在整个造模过程中,模型动物神态萎靡,不食不饮,腹部胀满,2~4d内陆续。
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组,采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs,运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。
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