后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.2-7.6），含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
原位杂交的预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×***洗涤5分钟×2次；37℃0.5×***洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×***洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×***洗涤15分钟×1-2次)。
1，组化
实验原理：组化（IHC），是应用抗原与特异性结合的原理，通过酶标与底物反应显色，从而对***细胞内抗原进行***、定性及定量的研究，称为***化学技术。组化（IHC）具有特异性强、敏感度高、***准确的优点。
1， 荧光
实验原理：荧光（IF），是应用抗原与特异性结合的原理，分子病理技术服务，通过荧光标记对***细胞内抗原进行***、定性及定量的研究。目前皮诺飞生物主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、***芯片进行荧光检测。皮诺飞生物目前已突破传统的荧光双标限制，开发出多色荧光技术（多可达7色）。
应用于分子病理诊断的DNA测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是Sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A、T、C、G4组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得DNA序列。直接测序法是***突变检测的“金标准”，其优点是结果准确，重复性好，可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多，耗时长，灵敏度低，过程不易控制，在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量PCＲ法替代。
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