共价偶联比物理吸附更***一些,主要表现在它克服了物理吸附的两个缺点:共价偶联在固体表面的***(1)排列取向一定程度上是确定的;(2)不容易脱离到溶液中。赖氨酸、谷氨酸和天冬氨酸等氨基酸经常被作为蛋白质修饰的靶点,其中赖氨酸尤甚(Chem. Sci., 2017,8, 63-77,Chem. Sci., 2018, 9,硅表面氨基修饰, 79–87),其它氨基酸由于位于蛋白质内部或反应性弱或不可控等原因而很少用于偶联。
1.简易芯片
制作简易芯片时,ITO玻璃表面氨基修饰,使用机械臂把大量已知或未知序列的DNA片段点在--张很小的玻璃片(通常为2cmX2cm)或尼龙膜上,再经过物理吸附作用达到固定化(cDNA 芯片)。也可以直接在玻璃板表面进行化学合成,表面氨基修饰的方法,从而得到寡聚核苷酸芯片。将芯片与待研究的eDNA或其他样品杂交,经过计算机扫描和数据处理,江西表面氨基修饰,便可以观察到大规模的***群在不同***、同一***不同发育时期或不同生理条件下的表达***调控情况。简易芯片一般的***数量少(一般不超过2000),主要用于研究小部分特定***的表达状态。简易芯片一般可以用于手工制作或者机械手点样。
防脱片用于细胞培养、病理学***和细胞制片、液基细胞学薄层制片,尤其是在液基细胞学薄层制片中防脱片的质量至关重要,而多聚左旋赖氨酸为目前***化学染色中的防脱,适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如效果不佳,可用双重处理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上两种方法均无效的情况下,可用如下方法:切片在脱蜡前放在APES l:50溶液中浸泡3分钟,晾干后即可进行下一步骤。
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