目前已有多种方法可以将寡核苷酸或短肽固定到固相支持物上。这些方法总体上有两种,即原位合成( in situ synthesis )与合成点样两种。支持物有多种如玻璃片、硅片、聚膜、纤维素膜、尼龙膜等,但需经特殊处理。作原位合成的支持物在聚合反应前要先使其表面衍生出羟基或氨基(视所要固定***芯片的分子为核酸或寡肽而定)并与保护基建立共价连接;作点样用的支持物为使其表面带上正电荷以吸附带负电荷的探针分子,什么是epoxysilane,通常需包被以氨基***或多聚赖氨酸等。
新兴的微阵列芯片技术是分子生物学技术和计算机技术高度有机结合的产物,体积小、实验效能高 , 可以节约人力、 物力和时间, 是对传统分子生物学研究方法和临床检测方法的重要补充 。在微阵列技术的实际应应用中 ,epoxysilane是什么,数据分析具有举足轻重的作用 , 目前还没有对现有的各种统计学模型进行过综合评价 。这一缺陷亟待弥补 。虽然人类***组草图已经绘制完成 , 但整个***组研究才刚刚开始 。此时如果没有把研究所产生的海量数据进行有效的管理 , 将对后续研究的深入和应用造成严重的影响 。从现有资料来看, 应用微阵列芯片技术所产生的数据还没有统一的管理方案, 这些研究的结果仍然分散地保存在不同的数据 库中,这些数据库也处在探索阶段 。
因此,一般的建议步骤是活化羧基使用pH=5-6的MES缓冲液,epoxysilane,之后使用PBS缓冲液调节pH=7.2-7.5完成后的偶联反应。
与EDC/NHS类似的是,也可以使用将两个含有氨基的分子连接到一起。比如,先在纳米粒子外包一层二氧化硅,通过APTES等***引入氨基,之后通过将氨基修饰的纳米晶和蛋白质的氨基偶联到一起。
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