固相萃取柱的填料
固相萃取填料通常是色谱吸附剂,大致可以分为三大类,分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。
一类是以硅胶为基质,如:Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱,硅胶极性很强,呈弱酸性,可被用于正相或反相两种分离模式:正相提取时,极性比硅胶弱,反相提取时非极性比C18 或 C8 的弱。对于类固醇有着较好的萃取效果通常用于非极性或弱极性化合物的萃取或极性杂质的去除。主要用于血样、尿样中***及其代谢物、多肽脱盐、环境样品中的痕量有机化合物富集、饮料中的有机酸。
第二类是以高聚物为基质,如:聚乙烯-二乙烯苯等。高纯度、高交联度的乙烯-二乙烯基苯聚合物为固定相填装的萃取小柱具有高载样量,可耐受 pH 条件和不同的溶剂,对极性化合物具有优异的保留能力。可用作酸性的、中性的和碱性化合物的通用型吸附剂,通常用于反相条件下保留含有亲水基团的疏水性化合物如:酚类、硝基芳香类等。
第三类是以无机材料为主的,如:弗罗里硅藻土、氧化铝、石墨化碳等。弗罗里硅土是一种氧化镁复合的极性硅胶吸附剂,以此为基质的萃取小柱适合于从非极性基质中吸附极性化合物,如多多环芳烃、有机氯农残等;石墨化碳黑(CARB)萃取小柱, 以石墨化碳黑为填料,硅胶色谱填料,萃取过程非常迅速。且对化合物的吸附容量比硅胶大一倍有余,由于石墨化碳黑表面的正六元环结构,使其对平面分子有极强的亲和力,非常适用于很多有机物的萃取和净化,尤其适于分离或去除各类基质如水果、蔬菜中的色素、甾醇等物质;以氧化铝为基质的填料有酸、碱、中性三种类型,适用于酸性、碱性的、中性溶剂的分离萃取。
FUJI HILIC ARG 硅胶
亲水化合物一般是用反相模式来进行分离,例如使用C18填料。但是,仍然有很多亲水的化合物不能用普通的反相模式来分离。近些年来,HILIC模式的填料应运而生,特别适合分离亲水性化合物(极性大的化合物)。富士硅化学有限公司开发了HILIC模式的“ARG硅胶”。ARG硅胶可用于分离氨基酸、多肽、***和核酸。不同粒径的ARG硅胶可分别应用于分析以及大规模的分离纯化。
为什么要做封端处理?
一般常见的硅胶填料(没有经过封端处理),pH耐受性都在2-8之间,硅胶色谱填料报价,在碱性环境下,硅胶的Si-O-Si-O结构会被***而溶解。即使在pH5-7的环境中,硅胶表面的Si-OH也会电离。使得碱性化合物产生拖尾,严重影响分离效果。封端处理以后可以减少待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应,改善和保持较好的峰形,这对于碱性化合物的分离尤其重要。而不同的封端技术也会直接影响色谱柱的效能。的硅胶填料经过特殊封端处理技术后(如UniSil Ultra系列产品),使得填料的pH耐受性有所提高(pH 2-10),并且覆盖硅胶金属杂质还可以减少碱性化合物的拖尾,硅胶色谱填料哪家好,增强峰型对称性。
通过在同等条件下,对UniSil Ultra与同类型的进口硅胶填料进行碱(pH10.0)冲洗,可以看出UniSil Ultra比同类型的进口D硅胶填料可以耐受更多次数和更长时间的强碱清洗(图5),从而证明UnSil Ultra的的耐碱性更强,使用寿命更长。
碱洗条件:MeOH/TEA (pH=10.0)=40:60
冲洗体积:60CV
柱效测试:流动相:ACN/H2O=60:40
柱温:35℃
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