TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5"-3"外切酶活性将探针酶切降解,定量pcr仪,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,进口PCR仪,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,pcr仪,即每扩增一条DNA链,实时荧光定量pcr仪,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行***定量分析,又可分析***突变(SNP),有望成为***诊断和个体化用药分析的技术平台。
PCR的反应包括三个主要步骤:分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热变性, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下附着于模板DNA两端。 后在DNA聚合酶 e.g. Taq-polymerase 的作用下进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。
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