5'去腺苷酶 应用说明:
• DNA或RNA的5'末端脱腺苷化。
• Aprataxin依赖的DNA修复实验。
5'去腺苷酶是来自于酵母(S. cerev***iae)的重组酶,可水解存在于活化的DNA或RNA分子的5´-5´焦磷酸键,释放5'-磷酸腺苷和5'-磷酸化核苷酸。酶对初级转录产物(5'-单磷酸化的RNA)或封端的RNA没有活性。
提供的酶为1000单位,浓度10 U /μL,同时提供一个10X反应缓冲液。
储存:储存在-20℃的冰箱中。
储存缓冲液: 50mM的Tris-HCl(pH 7.5)中含50%甘油,0.1M的N***,0.1mM的EDTA,1mM的DTT和0.1%的Triton®X-100。
单位定义:一个单位定义为30℃10分钟内去除来自5'-腺苷酸化的DNA23 -聚体寡核苷酸10pmolAMP所需要的酶量。
5'去腺苷10X反应缓冲液: 1M Tris***盐,pH值6.0,50mM的氯化镁。
污染活性测定: 5'脱腺苷酶是无核酸外切酶,内切酶和RNA酶活性。
参考文献
- Ahel, I et al., (2006) Nature 443, 713.