epicentre TSRNA1296 Totalscript™ RNA-Seq Kit
epicentre TSRNA1296 Totalscript™ RNA-Seq Kit 产品描述
应用
从高品质的总RNA中制备RNA测序文库。
本站由Nextera™提供,该TotalScript™RNA测序***盒可以从1-5纳克的完整总RNA中制备高复杂性的RNA测序文库。而不需要的poly(A)富集或rRNA的去除。该TotalScript RNA测序***盒采用了独特的转位™介导的适配器标记和cDNA的片段化处理,可在一天内实现RNA测序文库构建(图1)。
优势
· 只需要总RNA,不需要rRNA***去除。
· 产生方向性文库。
· 只使用1-5纳克的总RNA,1天内实现。
· 索引能力。(TotalScript™ Index Kit 单独出售。)
非常适于来自人类,啮齿动物,酵母,线虫和果蝇的高质量的RNA(RIN> 7)。(不推荐用于原核样品。)
图2(点击放大)。TotalScript RNA测序文库使用了随机引物,混合引物,Oligo(dT) 引物的cDNA合成策略以及TotalScript的***适缓冲液, 能从5ng总UHR RNA(通用的人类参考RNA)制备文库。
文库所产生rRNA的污染含量根据不同的cDNA的合成方法有很大的不同。随机六聚体引物可以产生<40%的序列与rRNA匹配,混合引物可以产生<25% rRNA 序列,而oligo dT 引物可以产生<5% rRNA序列。通过Oligo(dT) 引物产生的样品也会导致3´端读长的偏好性。不同来源的RNA的可能不会产生同一水平的rRNA污染
Table 1. 弹性操作
TotalScript能够适应所需的rRNA浓度和转录覆盖程度。
TotalScript™ RNA-Seq Kit
TotalScript™ Index Kit