- 一般随机生成57个碱基(19个氨基酸)的插入片段, 是任何***DNA的读码框。这些DNA包括表达的蛋白图谱,蛋白质工程或肽图谱。
- 简单,快速完成cDNA和***组***的测序
- 重要的DNA序列修饰,如启动子区域或结合基序。
The EZ-Tn5™ In-Frame Linker Insertion Kit
是一个基于转座子的蛋白修饰系统 ,它可快速容易的产生随机57bp编码表达蛋白的DNA片段。由于插入的是19个密码子的可读框架,盒子可用来鉴定关键调节因子,结合区域,催化区和任何蛋白位点。
该盒子包括一个卡那***筛选标记,两端是NotI位点。程序包括引入19个密码子的***DNA插入片段,如图1.一个简单的体外酶反应,随机插入一个EZ-Tn5 <Not I/KAN-3>转座子到每个***中,产生>106卡那抗性插入***。插入的***可通过***功能分析鉴定或通过转座子插入位点的测序图谱鉴定。所选择的***,通过notI酶切,转座子中存在卡那抗性(图2)。
每个notI消化的***可再连接后转化***大肠***(e.g., TransforMax™ EC100™ )感受态细胞,
得到的***每个含有一个随机的19密码子的插入可读框。因此在插入位点两端蛋白保留了原有的氨基酸序列。盒子提供两个未标记的引物,方便EZ-Tn5转座子插入位点的测序和绘制图谱。
优势:
- 产生> 10 6插入***,每一个***随机插入单一的??转座子,为客户提供***的全覆盖。
- 比传统Linker Scanning Mutagenesis更通用,在EZ-Tn5转座子的插入是随机的,并不限定于预先存在于***的DNA限制性内切酶位点。
- 独特的notI酶切位点方便连接插入制作图谱和额外的***构建。
![](http://images.cpooo.com/files/201912/03/m/1226059_1575359877.gif)
![](http://images.cpooo.com/files/201912/03/m/1226059_1575359894.gif)
参考文献
- Hoffman, L. and Loomis, K. (2000) Epicentre Forum 7(3), 4.
*Covered by issued and/or pending patents.
对此产品有兴趣,可联系中北林格获取更多详细信息。