




转印电泳的一抗和二抗
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育:将LG用稀释液稀释到适当的浓,在摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜5 X 5min,如果预实验中发现背景过高,可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育:二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG, 摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可适当降低延长二抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T:Tween-20(去污剂)
蛋白电泳问题处理
蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法
1:“微笑”(两边翘起中间凹下)形带,主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所
致,多出现于较厚的凝胶中。 处理办法:待其充分凝固再作后续实验。
2: “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法:在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
3:出现拖尾现象?
主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。
处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液;电泳缓冲液时间过长,重新配制
4:电泳的条带很粗?
电泳中条带很粗是常见的事,主要是未浓缩的原因。
处理办法:适当增加浓缩胶的长度; 保证浓缩 胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压
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LF-ZY02型 转印电泳槽
产品特点:
进口高强度PC材料注塑成型,坚固耐用,同时保护铂金电极丝不受损伤。
1小时内转印2块75mm×100mm凝胶,也可进行低强度过夜转印。
铂金电极丝相距40mm,以产生强电场保证有效蛋白转印。
颜色标记的转印三明治夹和电极,确保转印过程中凝胶的正确定向。
内置蓝冰冰盒,可快速吸收转印电泳过程中产生的热量。
即可作为完整的***电泳设备,又可作为一个模块与LF-Mini4电泳槽的缓冲液槽和上盖兼容。
产品用途:适用于普通的蛋白转印电泳。