




核酸电泳凝胶的染色
凝胶的染色和观察 凝胶中核酸带的染色,常用***化乙锭法和银染法。前者与琼脂糖凝胶的染色方法相同。
银染法的灵敏度较高,可如下操作:
(1) 将凝胶置固定液(10%乙醇,0.5%冰醋酸)中固定10分钟;
(2) 双蒸水洗1-2次;
(3) 置0.01mol/L AgNO3溶液中,室温反应15-30分钟;
(4) 充分水洗;
(5) 置NaOH-甲醛混合液(200ml 3%NaOH,小型转印电泳槽,含1ml甲醛)中反应至条带显色清晰,本底适宜;
(6) 用5%冰醋酸终止反应。
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电泳槽
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电泳槽是电泳系统的核心部分,小型转印电泳槽生产厂家,根据电泳的原理,小型转印电泳槽多少钱,电泳支持物都是放在两个缓冲液之间,电场通过电泳支持物连接两个缓冲液,不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有:(1)圆盘电泳槽:有上,小型转印电泳槽报价,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细.(2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在块垂直放置的平行玻璃板中间.(3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座,冷却板和电极.
蛋白质进行PAGE时,常用垂直板电泳。
垂直板电泳的优越性有:
a.表面积大而薄,便于通冷却水以降低热效应,条带更清晰。
b.在同一块胶板上可同时进行10个以上样品的电泳,便于在同一条件下比较分析鉴定,还可用于印迹转移电泳及自显影。
c.胶板制作方便,易剥离,样品用量少,分辨率高,不仅可用于分析,还可用于制备。
d.胶板薄而透明,电泳染色后可制成干板,便于长期保存与扫描。
e.可进行双向电泳。
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