




DNA电泳技术原理
根据DNA分子量不同,采用外加电场使其分开,用EB嵌入DNA分子后在紫外下显色。
琼脂糖凝胶电泳是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。
1) 在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下,带负电的核酸分子向正极迁移。由于糖一磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。
2) 在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分子本身的大小和构型。具有不同的相对分子质量和不同构型的DNA片段泳动速度不一样,蛋白电泳槽批发,可进行分离。
3) ***化乙锭在紫外光照射下能发射荧光,当DNA样品在琼脂糖凝胶中从负极向正极泳动时,***化乙锭从正极向负极移动,这样***化乙锭分子就会嵌入DNA分子中形成络合物,使DNA在紫外光下发射很强的荧光。在***化乙锭足够的情况下,荧光的强度正比于DNA的含量,这样就可以检测DNA的浓度。
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电泳槽液如何有效过滤?
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1、过滤精度——电泳槽液液过滤精度选择一般为25~75μm;
2、根据压差及时更换滤袋。更换时要简称过滤袋是否有破损;缝合是否结实牢靠,随着时间的延长,过滤袋会逐步堵塞,那就需要更换以确保正常的循环过滤效果。不同的电泳线过滤袋更换频度是不一样的,环境差、泳前清洗效果不好的、夏天主槽跟副槽泡沫过多、带入颗粒多的电泳线可能每天都得更换滤袋;而一些工艺管理完善、防尘环境好的电泳线一个月都不需要更换滤袋也是常有的事。
3、为了确保良好的电泳涂膜的外观质量,在槽液的循环管路中,在泳后清洗的循环UF液及循环去离子水管路中都应有过滤器装置,对槽液、循环清洗液进行较大限度的过滤。
槽液中机械杂质(环境污染、被涂物带入污染),凝聚颗粒(前处理带入的杂质与涂料反应生成的脏物)都将依靠循环系统中的过滤装置来清除。因此,要求过滤通过量2-4倍槽容量/小时。
常用的过滤器为袋式过滤器,过滤袋为无纺布材质,或聚丙烯材质。
过滤器由主循环泵驱动,蛋白电泳槽厂家,推荐在每一个主循环泵上串联两台袋式过滤器,这种配置方式中,过滤器选用孔径较大的过滤袋,以除去大部分大颗粒杂质,第二个过滤器选用较小孔径的过滤器以除去细小颗粒。
阴极电泳过滤袋可选用聚丙烯过滤袋;阳极电泳过滤袋为无纺布。
阳极电泳槽液过滤精度一般采用能通过50-75μm的过滤介质过滤袋。
阴极电泳槽液过滤精度一般采用能通过25-50μm的过滤介质过滤袋。
过滤器的清洗及过滤袋的更换视过滤器上的进出口压力而定,一般过滤器管线上并联旁通管线(推荐采用并联双桶过滤器的安装形式),在过滤器上应设置低排放点及上排气口,过滤器壳材质宜采用不锈钢。
那么哪些地方可能会导致漏胶或者漏液这种问题呢?
1. 玻璃板侧方或下方不小心因磕碰受损,这样玻璃板受损处则不再平整,液体会从这些部位漏出。这种情况下只能更换玻璃板,而很多垂直槽的玻璃板和边条压片是粘在一起的,这种情况则需要一起更换。
有时由于清洗不到位,边条压片表面会有污物凸起,蛋白电泳槽,也会导致两侧不能密闭夹紧而漏胶。
2. 两侧的夹扣变松,蛋白电泳槽供应商,或有些厂家的夹扣为了防止漏液,设计的很紧,时间长之后,玻璃板被挤压变形,密封性下降。这样玻璃板也会从两侧漏胶。
3. 底座的胶垫老化、变形或错位,玻璃板底部会发生漏胶。
4. 桌面不平整,玻璃板上夹具时不容易放正,玻璃板安装到夹具上时是相对于底座橡胶垫倾斜的,这样玻璃板底部会发生漏胶。
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