




蛋白电泳问题处理
蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法
1:“微笑”(两边翘起中间凹下)形带,主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所
致,多出现于较厚的凝胶中。 处理办法:待其充分凝固再作后续实验。
2: “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法:在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
3:出现拖尾现象?
主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。
处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液;电泳缓冲液时间过长,重新配制
4:电泳的条带很粗?
电泳中条带很粗是常见的事,主要是未浓缩的原因。
处理办法:适当增加浓缩胶的长度; 保证浓缩 胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压
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转印电泳槽
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LF-ZY03型 小型转印电泳槽
产品特点:
转印模块上部有导向口,可以保证转印夹顺利卡入。
转印时间短,普通蛋白电泳凝胶转印只需1个小时即可完成,也可进行低强度的过夜转印。
内置专用的蓝冰冰盒,可以快速吸收电泳过程中产生的热量。
槽内转印模块可与LF-Mini2型小型垂直电泳槽的上盖与下槽配套使用。
本产品可以快速、高质量地转印2块电泳凝胶,槽内能容纳2个凝胶转印夹。
技术参数:
转印凝胶面积:75mm×100mm。转印时间:1个小时,也可进行低强度的过夜转印。
电泳技术与病毒
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不同大小的蛋白质和核酸可以通过聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶电泳分离开来。在多数电泳技术中,每一种蛋白质或者核酸会形成一个条带。电泳技术的原理在于不同分子量的分子在凝胶中移动速率不同。将大小未知的蛋白质或者核酸分子在凝胶中的位置与相同凝胶中大小已知的分子比较,就能估计未知分子的大小。SDS-PAGE是在聚丙烯酰胺凝胶中在SDS去污剂存在情况下屏蔽掉蛋白质带电不同,从而估计蛋白质分子量。该项技术主要,在大小、电荷和结构的基础上,将电场施加于带电分子混合物上并引起迁移。
复杂的病毒成分可以按照双向电泳进行分离,即先按照蛋白质等电点进行分离(等电聚焦电泳),再依据蛋白质分子量进行第二向的分离(SDS-PAGE)。
核酸或者蛋白质经过电泳分离的谱型可以通过将其从凝胶上转移(印迹)到一层固相膜上。如果转移的是DNA,就叫sourthern印迹技术,用以纪念它的发明者Edwin Southern;1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法,对氨基酸的分离进行过研究。如果是RNA分子,就叫Nouthern blot,如果是蛋白质分子就是Western Blot。