




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免1疫学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。
1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,GAD ELISA***盒,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4. 确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。
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三.实验材料
仪器设备:1.酒精灯、三角烧瓶,培养皿;2.镊子、剪刀、剖针;3.双筒解剖显微镜;4.光照培养箱或温室;
材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。
***
(1)MS培养基,植物激1素:NAA、6-BA等;
(2)饱和漂液(次氯1酸钠);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)无菌水
四.实验步骤
豌豆苗的茎尖培养
⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟,(此步以后要求无菌)用无菌水中冲洗5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培养皿中。
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1.3.3 特异性
抗原抗1体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗1体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗1体反应具有高度的特异性。例如乙1肝1病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗1体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗1体结合,而不与另外两种抗1体反应。抗原抗1体反应的这种特异性使***测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血1清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。
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