




转印电泳AG与LG反应的特点:特异性、比例性、可逆性
1,特异性:由抗原决定簇和LG分子的超变区之间空间结构的互补性确定的。
2,比例性:抗原与LG发生反应需遵循一定的量比关系。
3,可逆性:抗原LG结合形成复合物后,聚丙烯酰胺电泳槽,在一定条件下又可解离***为抗原与LG的特性。
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电泳技术原理(以琼脂糖凝胶电泳为例)
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首先介绍使用的载体--琼脂糖。
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳***糖和1,聚丙烯酰胺电泳槽多少钱,4连结的3,6-脱水α-L-半乳***糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。
核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤
操作方法如下:
(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;
(2) 称取适量琼脂糖,置电泳缓冲液中,加热使琼脂糖溶解;
(3) 待溶液冷至60℃,加入10mg/ml EB贮存液,聚丙烯酰胺电泳槽生产厂家,使终浓度达0.5mg/ml;
(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳,将琼脂糖溶液倒入胶模中,厚度约3-5mm,注意避免产生气泡;
(5) 凝胶完全凝固后,移去梳子和透明胶,将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;
(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后,聚丙烯酰胺电泳槽厂商,加入样品槽中;
(7) 接通电源,使样品槽在负极端,用1-5v/cm的电压,电泳适当时间;
(8) 电泳结束后,可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察,并拍照记录,也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟,再如上观察和拍照,记录结果。
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