蛋白凝胶电泳的分类
蛋白凝胶电泳分为非变性凝胶和变性凝胶
所谓非变性凝胶,即在凝胶中不加SDS和尿素等变性剂,这种凝胶中,蛋白质仍保持活性,其迁移率受它的静电荷与分子大小两个因素的影响。因此在非变性凝胶中进行电泳是不能测得分子量的,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。
所谓变性凝胶,即在凝胶中加入变性剂,如尿素、SDS(十二***磺酸钠)、DTT等。这些变性剂可以***或改变蛋白质的结构,把绝大部分蛋白质分离成组成它们的亚基。同时在蛋白质分子周围包围了大量负电荷。这种电荷基本上掩盖了无变性剂存在时正常就有的任何电荷。蛋白质在这种变性凝胶中的迁移率与它们分子量的对数成直线关系。因此利用变性凝胶进行电泳可以测得蛋白质的分子量。目前应用较多的变性剂为SDS。蛋白电泳的分子筛效应和电荷效应北京龙方科技***生产、销售电泳槽,以下信息由龙方科技为您提供。
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蛋白电泳
蛋白电泳样品的浓缩效应
1:凝胶孔径的不连续性:
浓缩胶为大孔胶;分离胶为小孔胶。在电场作用下,样品颗粒在
大孔胶中泳动的阻力小,移动速度快;当进入小孔胶时,受到的阻
力大,移动速度减慢。因而在两层凝胶交界处,样品迁移受阻而压
缩成很窄的区带。
2: 电位梯度的不连续性:
电泳开始后,快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低 的低电导区,使局部电位梯度增加,将蛋白质浓缩成狭窄的区带
大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷,在电场中,都向正极移动。
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琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶,然后倒入胶模中,凝固后将形成一种固体基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。
将凝胶置电场中,在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移,迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳缓冲液、嵌入染料的量等因素影响。在不同条件下电泳适当时间后,大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上,从而达到分离的目的。产品特点:10×10cm凝胶面积,适合包含双向电泳凝胶在内的多种转印应用。琼脂糖凝胶的分离范围较广,用各种浓度的琼脂糖凝胶可分离长度为200bp至50kb的DNA。
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电泳概述
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电泳涂装是以水溶性或水分散性的涂料为主要原料,被涂物浸在涂料中作为阴极或阳极,再加入导电性对应电极,通以直流电而在工件表面形成涂料层。一般根据涂料性质分阴极电泳和阳极电泳。其成膜过程分四步:
1)、电解
2)、电泳
3)、电沉积
4)、电渗