默沙克生物科技公司(查看)-瘦素elisa***盒

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　双抗1体夹心法是检测抗原1常用的方法，操作步骤如下：

　　1）将特异性抗1体与固相载体联结，形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。

　　2）加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合，形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

　　3）加酶标抗1体，保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。

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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

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　在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗1体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同（参见1.3.2，图1-4），如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，瘦素elisa***盒，这种现象被称为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法***测定标本中含量可异常增1高的物质（例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类***可削弱钩状效应。