转印电泳的分类及注意事项：
Western Blotting（蛋白质单项电泳后印迹转移）
Eastern Blotting（蛋白质双向电泳后印迹转移）
Southern Blotting（DNA印迹） Northern Blotting（RNA印迹）
在转印过程中要控制温度 ，在低温或者冷循环条件下进行
对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转
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蛋白电泳常见问题与解决方法
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蛋白电泳常见问题及解决方法:
一，条带出现“微笑”现象（中间凹下两边翘起）
主要是凝胶中间部分的凝固不均所致，多出现较厚凝胶中，应待凝胶充分凝固后再做后续操作。
二，条带出“皱眉”现象（中间凸起两边下垂）
两板之间底部气泡所致，应排除底部气泡。
三，Western blot批发，条带出现“拖尾”现象
主要是样品溶解效果不佳；分离胶浓度过大；电泳缓冲液时间过长。
建议：加样前离心；选择合适的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；重新配制电泳缓冲液；降低凝胶浓度。
四，条带出现纹理现象
样品中不溶性颗粒引起的。
加样前离心，加适量样品促溶剂。
五，指示带已跑出板底，但样品条带还未跑下来
与缓冲液和分离胶浓度有关。
更换正确PH值的缓冲液，Western blot，降低凝胶浓度。六，染色背景高，染色过程中***变为蓝色
核酸电泳常用染色液
1、***化乙锭（ethidium bromide， EB）
较为常用的核酸荧光染料，可嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线激发下，发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光，比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍，因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。若EB背景太深，可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCI2中5min，使非结合的EB褪色，这 样可检查到10ng的DNA样品，EB也可用于检测单链DNA或RNA，但其对单链核酸的亲和力相对较小，荧光产率也相对较低。
2、***橙（acridine orange， AO）：
***橙可嵌入双链核酸碱基对之间，在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合，在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸，Western blot厂家，灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。但***橙的染色操作要求严格，应在 22℃，0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。
3、亚甲蓝（methylene blue）
可将RNA染成蓝色，但灵敏度不高，而且操作时间长。染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝，10mmol/L Tris-Ac（pH8.3），4℃放置1~2h，用净水洗5~8h（反复换水），带型肉眼可见，较低检测量为 250ng。
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