转印电泳的分类及注意事项:
Western Blotting(蛋白质单项电泳后印迹转移)
Eastern Blotting(蛋白质双向电泳后印迹转移)
Southern Blotting(DNA印迹) Northern Blotting(RNA印迹)
在转印过程中要控制温度 ,在低温或者冷循环条件下进行
对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转
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DNA电泳原理
DNA电泳原理
生物大分子在一定pH条件下,通常带电荷,将其置于电场中,会以一定的速度向与其电荷性质相反的电极迁移,RNA电泳槽公司,迁移速度称电泳速率。
电泳速率与电场强度、分子所带的净电荷数成正比,RNA电泳槽多少钱,与分子与介质的摩擦系数成反比。 摩擦系数与分子的大小、构型及介质的粘度有关。
在生理条件下,DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态,故DNA实际上呈多聚阴离子状态,RNA电泳槽,在电场中向 正极方向迁移。
糖-磷酸骨架在结构上重复,故等量的双链DNA几乎带等量的净电荷。
如电场强度一定、电泳介质相同,电泳速率就取决于核酸分子的大小和构型。 构型相似的分子:分子量越大、迁移越慢。
核酸电泳凝胶的染色
凝胶的染色和观察 凝胶中核酸带的染色,RNA电泳槽价格,常用***化乙锭法和银染法。前者与琼脂糖凝胶的染色方法相同。
银染法的灵敏度较高,可如下操作:
(1) 将凝胶置固定液(10%乙醇,0.5%冰醋酸)中固定10分钟;
(2) 双蒸水洗1-2次;
(3) 置0.01mol/L AgNO3溶液中,室温反应15-30分钟;
(4) 充分水洗;
(5) 置NaOH-甲醛混合液(200ml 3%NaOH,含1ml甲醛)中反应至条带显色清晰,本底适宜;
(6) 用5%冰醋酸终止反应。
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