垂直电泳槽漏液的原因
电泳槽密封条漏液的原因与处理(垂直槽)
一般情况下,电泳槽较窄的密封条不易漏夜,反之较宽的则比较容易漏,发现电泳槽漏液时要检查:
1、密封条是否老化或损坏,若已经老化或损坏,应更换密封条。
2、如果密封条完好无损,目测检查密封条是否有凹凸不平现象,如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条,使其自然地嵌入密封槽内,并保证安装均匀,避免密封条出现凹凸现象。
3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出,则说明漏处比两边凹(不在同一水平线上),我们则需要把密封条拆下,清理干净槽内胶粘剂,然后再将薄厚相当的窄边条(如0.4毫米)粘在槽内,以垫起凹下的密封条,使其与两边保持一致,此后再将密封条粘在槽内即可。电泳槽内无电流(铂金电极上无气泡)1、首先利用万用表检查电泳电源有无输出电压(注意选择直流电压挡,输出不得超过量程,以免损坏万用表)。
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转印电泳的一抗和二抗
转印电泳的一抗和二抗
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一抗孵育:将LG用稀释液稀释到适当的浓,在摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜5 X 5min,如果预实验中发现背景过高,可以增加洗膜时间或洗膜次数
二抗孵育:二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG, 摇床上孵育2h(如果做过预实验后发现条带较淡,可适当降低延长二抗孵育时间)
洗膜:用PBST或者TBST洗膜3 X 10min
T:Tween-20(去污剂)
LF-31DN型 水平琼脂糖电泳槽
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产品特点:
聚碳酸酯注塑成型,操作方便,可以制作四种不同规格的琼脂糖凝胶;
凝胶托盘带有加样背景黑带和荧光标尺,便于加样和观察;
透明上盖开孔式设计,便于散热;
高柔韧性导线,开盖断电,确保安全;
下槽桥式设计,节省缓冲液;
上盖具有限位功能,保证操作准确。
技术参数:
电极铂金丝纯度为99.95%,电场强大、稳定;
凝胶板规格(L×W):60×60mm;120×60mm(宽胶);
60×120mm(长胶);120×120mm;
样品梳:11 25齿(1.0mm厚);6 13齿,8 18齿(1.5mm厚);
2 3齿(2.0mm厚) ;
缓冲液总容量:约650ml
产品用途:适用于分离、制备DNA、RNA。
电泳的分类
⑴ 区带电泳:电泳过程中,待分离的各组分分子在支持介质中被分离成许多条明显的区带,这是当前应用较为广泛的电泳技术。
⑵ 自由界面电泳: 这是瑞典Uppsala大学的科学家Tiselius较早建立的电泳技术,是在U形管中进行电泳,无支持介质,因而分离效果差,现已被其他电泳技术所取代。
⑶ 等速电泳:需使用专用电泳仪,当电泳达到平衡后,各电泳区带相随,分成清晰的界面,并以等速向前运动。
⑷ 等电聚焦电泳:由两面性电解质在电场中自动形成pH梯度,当被分离的生物大分子移动到各自等电点的pH处聚集成很窄的区带。