电泳槽液如何有效过滤?
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1、过滤精度——电泳槽液液过滤精度选择一般为25~75μm;
2、根据压差及时更换滤袋。更换时要简称过滤袋是否有破损;缝合是否结实牢靠,随着时间的延长,过滤袋会逐步堵塞,那就需要更换以确保正常的循环过滤效果。不同的电泳线过滤袋更换频度是不一样的,环境差、泳前清洗效果不好的、夏天主槽跟副槽泡沫过多、带入颗粒多的电泳线可能每天都得更换滤袋;而一些工艺管理完善、防尘环境好的电泳线一个月都不需要更换滤袋也是常有的事。
3、为了确保良好的电泳涂膜的外观质量,在槽液的循环管路中,在泳后清洗的循环UF液及循环去离子水管路中都应有过滤器装置,对槽液、循环清洗液进行较大限度的过滤。
槽液中机械杂质(环境污染、被涂物带入污染),凝聚颗粒(前处理带入的杂质与涂料反应生成的脏物)都将依靠循环系统中的过滤装置来清除。因此,蛋白电泳槽批发,要求过滤通过量2-4倍槽容量/小时。
常用的过滤器为袋式过滤器,过滤袋为无纺布材质,或聚丙烯材质。
过滤器由主循环泵驱动,蛋白电泳槽公司,推荐在每一个主循环泵上串联两台袋式过滤器,这种配置方式中,过滤器选用孔径较大的过滤袋,以除去大部分大颗粒杂质,第二个过滤器选用较小孔径的过滤器以除去细小颗粒。
阴极电泳过滤袋可选用聚丙烯过滤袋;阳极电泳过滤袋为无纺布。
阳极电泳槽液过滤精度一般采用能通过50-75μm的过滤介质过滤袋。
阴极电泳槽液过滤精度一般采用能通过25-50μm的过滤介质过滤袋。
过滤器的清洗及过滤袋的更换视过滤器上的进出口压力而定,一般过滤器管线上并联旁通管线(推荐采用并联双桶过滤器的安装形式),在过滤器上应设置低排放点及上排气口,蛋白电泳槽价格,过滤器壳材质宜采用不锈钢。
琼脂糖水平电泳槽
琼脂糖水平电泳槽实验操作
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1. 根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为 1× TAE或0.5×TBE。
注意:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉。
注意:总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖
注意:必须保证琼脂糖充分完全溶解,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入EB溶液使其终浓度为0.5ug/ml,并充分混匀(EB为***品,不提倡使用)。
注意:EB是一种致***物质。使用含有EB的溶液时,请戴用手套。EB在可见光下会分解。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中,蛋白电泳槽,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5-8 mm 之间。
注意:不要产生气泡,溶液温度太高(gt;60℃),会使得水分
过分蒸发,改变凝胶离子浓度,影响电泳效果。
6.在室温下使胶凝固(大约30 分钟),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注意:凝胶不立即使用时,用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存,或者放在制胶的缓冲液中,一般可保存2~5 天。
DNA电泳原理
生物大分子在一定pH条件下,通常带电荷,将其置于电场中,会以一定的速度向与其电荷性质相反的电极迁移,迁移速度称电泳速率。
电泳速率与电场强度、分子所带的净电荷数成正比,与分子与介质的摩擦系数成反比。 摩擦系数与分子的大小、构型及介质的粘度有关。
在生理条件下,DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态,故DNA实际上呈多聚阴离子状态,在电场中向 正极方向迁移。
糖-磷酸骨架在结构上重复,故等量的双链DNA几乎带等量的净电荷。
如电场强度一定、电泳介质相同,电泳速率就取决于核酸分子的大小和构型。 构型相似的分子:分子量越大、迁移越慢。
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