




使用过程出现的问题原因及解决办法
(1)聚丙烯酰胺电泳时“皱眉”(两边向下中间鼓起)形带原因:聚丙烯酰胺电泳主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
(2)聚丙烯酰胺电泳带出现纹理现象:聚丙烯酰胺电泳主要是样品不溶性颗粒引起的。

处理办法:加样前离心;加适量样品促溶剂。
(3)聚丙烯酰胺电泳时出现“鬼带”:聚丙烯酰胺电泳时“鬼带”就是在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时,常会出现在泳道顶端(有时在浓缩胶中)的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀,主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性,致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合,聚合成大分子,其分子量要比目标条带大,有时不能进入分离胶。但它却于目标条带有相同的学活性,在WB反应中可见其能与目标条带对应的作用。聚丙烯酰胺在造纸领域中效果取决于其平均分子量、离子性质、离子强度以及其它共聚物的活性。
处理办法:在加热煮沸后,再添加适量的DTT或Beta,以补充不足的还原剂;或可加适量EDTA来阻止还原剂的氧化。
聚丙烯酰胺配成的溶液不要用离心泵转移,以免高速旋转的叶片造成聚合物的剪切降解。配制的具体方法如下:
在容器(如实验室的烧杯,工厂的配制罐)中加入一定量的清水,按清水量及浓度计算所需的粉状聚合物量,称出聚合物;
开启电动搅拌器,将清水搅出漩涡,搅拌器叶片末端的线速度不要超过8米/秒,以免造成聚合物降解;但又不能太慢,以免聚合物颗粒浮在水面上,或在水中下沉、结团。

将聚合物缓缓撒入水的漩涡中,注意聚合物颗粒进入水里后不能互相粘连、结团。然后再搅拌一段时间,使聚合物颗粒充分溶解,较后成为均匀、透明、粘稠的溶液,无肉眼可见的团块。这段搅拌时间按下面方法确定:
(1).在夏季水温较高时,阴、阳离子型聚合物需搅拌1小时左右,非离子型聚合物需搅拌2小时左右;
(2).在冬季水温较低时,阴、阳离子型聚合物需搅拌1.5小时左右,非离子型聚合物需搅拌3小时左右。
聚丙烯酰胺残余单体含量:PAM的残余单体含量是指在丙烯酰胺聚合为聚丙烯酰胺过程中,未反应完全并较终残留于聚丙烯酰胺产品中的丙烯酰胺单体含量,是衡量是否适用于食品工业的重要参数。

在这里,我们聚丙烯酰胺生产厂家建议,聚合氯化铝不能和聚丙烯酰胺混合使用,应先使用聚合氯化铝,再使用聚丙烯酰胺才是正确的使用方法。