




培养基培养方法:
1.配料,配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种***〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。
2.溶解,淀粉溶解:少量冷水调成糊状加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH,用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
细胞培养小妙招
1、拿到新细胞的时候要做好支原体检测,不管是买的细胞、惠赠的细胞,并迅速扩增冻存。
2、离开过操作台的东西再进入操作台之前一定要用酒精喷一遍,包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。
3、细胞的密度根据细胞的性质、传代的时间以及自己的心情来定。培养基的话***多不要超过2天就要换一次。细胞可以不传代,但是培养基是一定要换的。
对于大部分***,比较合适的保存方式是分装后保存在 -20 度 or -80 度对绝大多数***来说,保存在-20 度是完全足够了。没有任何证据显示保存在-80度 会有更多的好处!
(1) 分装可以***大程度的降低反复冻融对***活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取***造成的污染可能性。
(2) 分装的量以一次实验用完为好,***少不能少于10ul 每份。因为分装体积越小,***的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响
(3) 复融后的分装***如果一次用不完,将剩余母液保存在4 度,避免再冻起来!
(4) ***工作液应该当天配制当天用完,在4 度 尽量不要超过1 天。
(5) 避免将***保存在自动除霜冰箱中。尽量将***保存在冰箱里层,而不是门上。
***中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
(1)细胞生长。我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它血 清生产商也证明了这一点。
(2)过滤。如果***中出现大量的沉淀物,***将很难过滤。一般说来,因为在***生产时 ***后已经经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过 滤用于细胞培养的***。在实验室中没有必要再过滤处理***,在大觃模的细胞培养中往往将 ***直接加到培养基中一起过滤。