武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
目前市场上的ELISA***盒质量参差不齐,如何去挑选适合自己的***盒就显得特别重要,具体有以下几点可供参考:
一、特异性
ELISA***盒的特异性与***盒的关键组分,抗1体对有关,若抗1体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。
二、灵敏度
灵敏度反映的是***盒检出被检物质的1低量的能力,用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的***盒,如果待检指标量很低,一般的***盒不能满足要求,可选择高敏的ELISA***盒。
三、重复性
科学实验讲求重复性,一般ELISA***盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
四、简便性
***盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎!这也不妨作为选择***盒的一个指标。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,1好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶1标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传1染物处理。
9. 本***不同批号组分不得混用。
在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗1体及酶标抗1体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗1体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法***测定标本中含量可异常增1高的物质(例如血1清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的1高值。用高亲和力的单克1隆抗1体制备此类***可削弱钩状效应。抗1体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(p1ostzone)。
1. ELISA的原理
ELISA的基础是抗原或抗1体的固相化及抗原或抗1体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗1体仍保持其***学活性,酶标记的抗原或抗1体既保留其***学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗1体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗1体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗1体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗1体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。它与ANP均属于心脏利钠肽类,由于它们的发现使人们认识到心脏也是一种内1分泌器1官。由于酶的催化效率很高,间接地放大了***反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。