武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
1.3.2 适比例
在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物(沉淀)的量见图1-4。(1)分子结构不同:BNP的分子结构中有一个非常重要的二硫键连接构成的环状结构,可与钠尿肽受体结合发挥生物学活性作用。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围,称为等价带(zone ofequivalence)。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩,则无沉淀物形成,在***测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗1体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(p1ostzone)。在用***学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗1体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
⑦切成的蜡带到20-750px长时,右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,以免卷曲,并牵引成带,平放在蜡带盒上,靠刀面的一面较光滑,朝下,较皱的一面朝上。
⑧用单面刀片切取蜡片一小段,放在载玻上加水一滴,置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。
⑨切片工作结束后,应将切片刀取下用氯1仿擦去刀上沾着的石蜡,把切片机擦拭干净妥为保存。
9. 展片、贴片
打开水浴锅,使水温维持在40-45℃,另准备30%乙醇溶液。
② 切片时,将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。
② 用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带,放在乙醇溶液的水面上,使切片展开。(可省)
③小镊子轻轻地将连在一起的切片分开,用一个载玻片将切片完整,已展开的切片捞至温水中,使之充分展开。
双抗1体夹心法是检测抗原1常用的方法,操作步骤如下:
1)将特异性抗1体与固相载体联结,形成固相抗1体。洗涤除去未结合的抗1体及杂质。
2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗1体结合,形成固相抗原抗1体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗1体,保温反应。固相***复合物上的抗原与酶标抗1体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗1体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4)加底物显色。三、重复性科学实验讲求重复性,一般ELISA***盒,其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清,包被和酶标用的抗1体1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆抗1体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应,作一步检测。