细胞老化有哪些表现?1.细胞的贴壁性减弱,开始有细胞漂浮于培养液中。2.老化的细胞,表面分泌物会增多,细胞表面的纯净度越来越低。3.分裂的细胞数量明显的减少同时细胞的增殖速度也会大大下降。4.细胞开始长角分化。细胞老化,可能有这些原因?1.在体外传代次数太多或太久,2.培养液营养不够,3.接种密度不当,4.培养液pH偏离,
MTT检测法,细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出细胞数量。在一定细胞数范围内,吸光值与细胞活性成正比。
细胞***的常见表现:1.细胞生长缓慢 :细胞周期缓滞或是停滞都是***细胞的基本特征,此时细胞周期主要停滞于G1期。2.表面分泌物会增多:细胞***时显微镜下可见小黑点,但是小黑点增加,也有可能与培养条件如pH,生物污染等有关。3.细胞形态改变:如细胞体积增大、细胞扁平、胞核与核仁体积增加,如果是贴壁细胞,其细胞表面会明显观察到比较脏,运用常规HE染色结果会发现,细胞表面有很多附着的脏物,细胞形态与刚开始培养的细胞外观明显不同,像是上皮细胞等可能会出现很多梭状形态,且细胞质突起等形状异常细胞。
***细胞的细胞器发生变化,如高尔基体和溶酶体数量增多、体积增大,导致细胞质内颗粒明显增多。细胞培养时可能导致***的原因:1.细胞密度过高或过低,细胞过密产生接触作用,导致细胞的活力减弱以及细胞增殖减慢,后出现***。2.长时间未更换细胞培养基.3.使用劣质细胞培养***,使用合适的培养基,不同的细胞对培养基的要求不同,所以筛选适合细胞培养的培养基,预防细胞***,维持细胞正常生长。