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将细胞冻存管由液态氮中取出，***稀释液公司，置于室温回温，不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养 基、无菌15ml离心管、培养瓶。在生物安全柜内，直接以少量培养基反复冲融，使细胞团块化冻。 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基，再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g，3分钟离心收集细胞。 倒去上清液，重悬细胞，移到培养瓶中培养。

CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞；当CFSE扩散穿过细胞膜，会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发，发出绿色荧光，这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合，形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖，福州***稀释液，胞内荧光蛋白会被平均分配到下一代细胞中，***稀释液出售，因此细胞荧光强度会随着增殖代数增加而不断地降低，可用流式细胞仪进一步侦测分析得出细胞分裂增殖的情况。CFSE的浓度，***稀释液批发，对于终判断细胞增殖结果有直接性的影响！

细胞老化的表现：细胞折光性变差，镜下可见细胞“变薄”，做转染实验时，细胞死率会较高。但培养液不会发生迅速变黄的现象，仍清亮。（但如果是***污染的话，一般会出现培养液的迅速变黄，混浊，镜下可见大量繁殖的***；若是支原体污染的话，细胞也会失去正常形态，会有细胞的死）。细胞的贴壁性减弱，开始有细胞漂浮于培养液中。