随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。液相色谱仪成为解决生化分析问题有前途的方法。制备***谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。由于液相色谱仪具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生***学、食品分析、研究、环境分析、无机分析等各种领域。液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。质谱连用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯和多核芳烃等,液相色谱仪连用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。液相色谱仪的维护与维修 ,液相色谱仪常见故障与排除方法 : 泵:单向阀 现象:柱压波动范围很大。原因:单元向阀污染或阀内进入气泡引起。污染使得球与阀座密封不严,液流倒流,压力不稳,或球与阀座粘在一起阻死。气泡进入阀中会紧贴在阀体的一侧,使球难以返回到阀座,引起倒流,使压力和流速变化范围大,有时甚至为零。措施:对于污染用不同极性的一系列溶剂冲洗有可能解决问题,如用25mL水依次冲洗。或拆下进出单向阀放在10%的液内超声清洗30~60min,若仍不解决问题则要更换单元向阀。对于阀内进入气泡不必弄清气泡存在何处,只要打开泄液阀大流速冲洗就可解决问题,在冲洗泵时可用扳手迅速打开泵头上的输出管路,以促进气泡排出。
液相色谱仪的***维护与气相色谱仪没有多大区别,液相色谱仪的几个维护***的部件,液相色谱仪的主要部件有色谱柱、进样器、检测器、泵,下面我们分别来说明这几大部件的***维护方面。
色谱柱大家都不陌生,是我们做分析的必需品,无论是液相色谱仪还是气相色谱仪都离不开色谱柱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。色谱柱是化合物分离的关键,我们在安装时要保证阀件管路的清洁,并且不能碰撞、弯曲或强烈震荡色谱柱,在长期不使用色谱柱的时候要用保存封闭,分析结束后要用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱,流动相在使用前必须进行脱气处理,尽量不使用或少使用高粘度的流动相,在满足灵敏度的前提下,尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏,要进行净化或提纯处理。进样器是液相色谱仪的主要部分之一,我们也要定期进行维护工作。液相色谱仪的检测器在每次分析完成要立即关闭。 泵是液相色谱仪的心脏,我们要定期维护***,这样才能使得其处于状态,能报保证基线平稳,保留时间重现性好,梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。
HPLC的特点和优点
HPLC有以下特点:
高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米为75 Kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
