武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。
萝卜(Raphanus sativus L.)是一种重要的十字花科根菜类作物,具有较高的营养价值,在中国乃至世界都有广泛种植。葡萄糖苷是一种重要的植物次生代谢产物,主要存在于萝卜等十字花科植物中。硫苷及其降解产物在植物防御、风味形成以及人类预防中起重要的作用,此外,它还具有作为生物的潜力。MYB转录因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成过程中的关键调控***,其表达量的多少直接影响萝卜中硫苷的含量和分布。调控***的某些特性在拟南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有广泛研究,然而在萝卜研究领域关于MYB28和MYB29的分子特性、表达特征尚未见报道。因此,本以萝卜品种"NAU-ZQH"为材料,通过比对拟南芥中MYB28和MYB29的序列与本实验室萝卜转录组序列,萝卜中调控硫苷合成的两个关键***R***YB28和R***YB29,之后从亚细胞***、转录活性和表达特征等多方面进行研究,以期,增加对萝卜中R***YB28和R***YB29***分子特性和表达特征的认识,为后期通过***改良培育出硫苷含量较高的萝卜新品种提供理论基础。
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CaNZ是CaN(Calcineurin)***的正义表达***,是在真核生物中存在的一个Ca2 及CaM依赖的Ser/Thr蛋白磷酸酶,它包括一个催化亚基calcineurin A和一个Ca2 结合亚基calcineurin B,其催化亚基calcineurin A活性受CaM调节。本实验在筛选再生体系基础上,利用带有信号肽和CaM结合肽的载体,以农为媒介将CaN***导入中,预期过表达的融合蛋白将会被分泌到细胞外并与质外体CaM相结合,***质外体CaM的功能,从而构建出质外体CaM的反义植株,观察质外体CaM反义植株的表型改变,为进一步开展CaM在植物生长发育过程中的功能研究提供基础。 研究结果如下: (1)以14-16d叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过附加配方对比,筛选出适合材料再生的培养基配方:MS IAA 0.5mg·L-1 6-BA 1.5mg·L-1为芽分化的培养基,1/2MS NAA0.1mg·L-1为生根培养基。 (2)用Kan进行叶片抗性筛选。当Kan浓度小于50mg·L-1时,叶片能正常分化出芽;当Kan浓度为75mg·L-1时,叶片大多数白化;当Kan浓度超过100mg·L-1时,芽分化停止。所以,以Kan浓度100mg·L-1为叶片分化芽抗性筛选的临界浓度;而培养物根对较为敏感,Kan 50mg·L-1为筛选临界值。
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以NHD_3、NC、NF三种马铃薯品种的茎段为外植体,筛选出诱导形成愈伤***的培养基,探讨不同转化条件对马铃薯遗传转化效率的影响。结果表明:在1.0 mg·L~(-1) 6-BA浓度不变情况下,洋葱亚细胞***怎么做,愈伤诱导培养基中NHD_3、NC、NF茎段分别在NAA浓度为0.2、0.3、0.4 mg·L~(-1)时愈伤形成及生长;在茎段预培养2 d,共培养2d,农菌液在OD_(600)=0.6的条件下转化所得抗性愈伤诱导率。
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